品牌：Miltenyi 货号：130-092-658 规格：for 1×109 total cells
产品介绍
用于从人外周血细胞中阳性选择活化的CD154+抗原特异性CD4+ T细胞。
CD154抗体特异性识别人CD154抗原，这是一种39 kDa的跨膜糖蛋白，也被称为CD40L、gp39、T-BAM、TRAP或Ly-62。CD154在活化的CD4+ T细胞上瞬间上调，并通过CD40的连接在T细胞/抗原呈递细胞相互作用中作为共刺激分子发挥重要作用。由于CD154在激活后数小时内短暂表达，因此可以作为活化抗原特异性CD4+ T细胞的标记物。在刺激过程中，在细胞悬液中加入CD40阻断抗体，可防止与抗原呈递细胞上表达的CD40相互作用诱导的CD154表达下调。
产品优点
1、简单、快速；
2、 温和高效；
3、 不会引起细胞活化。
产品应用
可用于各种研究，如细胞因子表达或受体信号传导
应用数据
分选前 分选后
CMV pp65–刺激样本 未刺激对照样本 CMV pp65–刺激样本 未刺激对照样本
使用CD154 MicroBead kit、两根分选柱和MiniMACS™分离器从CMV+供体的人外周血中分离CD154+ T细胞。用PepTivator CMV pp65（# 130-093-438）刺激PBMCs 16小时，在刺激期间添加CD40阻断抗体以防止CD154的下调。随后，使用CD154 MicroBead Kit分离CD154+细胞。用Anti-Biotin-PE（# 130-090-756）和CD4 (VIT4)-APC（# 130-092-374）对细胞进行荧光染色，检测CD154+细胞。基于散射信号和碘化丙啶去除细胞碎片和死细胞
References for CD154 MicroBead Kit, human
Publications
1.Bacher, P. et al. (2014) Antigen-specific expansion of human regulatory T cells as a major tolerance mechanism against mucosal fungi. Mucosal Immunol 7 (4): 916-928
2.Schmied, S. et al. (2015) Analysis of the functional WT1-specific T-cell repertoire in healthy donors reveals a discrepancy between CD4+ and CD8+ memory formation. Immunology 145 (4): 558-569
3.Bacher, P. et al. (2013) Antigen-reactive T cell enrichment for direct, high-resolution analysis of the human naive and memory Tʜ cell repertoire. J Immunol 190 (8): 3967-3976
4.Frentsch, M. et al. (2005) Direct access to CD4+ T cells specific for defined antigens according to CD154 expression. Nat Med 11: 1118-1124